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难溶肽纯化技术

      在我们多肽生产纯化过程中,经常会遇到难溶的序列,这导致了众多多肽公司多肽成产过程中收率低,难纯化,成品纯度不合格甚至多肽生产失败等后果,这种难溶性与多肽自身的氨基酸组成及序列有密切关系,我们在多肽领域内长期深入的研究,让我们积累了大量的宝贵经验,保证我对于难溶肽的溶解纯化保持很高的成功率和产品质量。
      我们对于难溶肽的溶解总结出以下几点:

(1)

通常整体显酸性的多肽溶解困难时可以加入适量的碱性溶液,而显碱性的多肽溶解困难时可以加入适量的酸性溶液;。

(2)

序列中含有大量疏水性氨基酸或中性氨基酸时,难于直接溶于水,通常需要先加入少量有机溶剂,溶解完全后用蒸馏水大量稀释,常用的有机溶剂有乙腈,DMSO,DMF,丙醇,异丙醇等;

(3)

当肽链中含有Met或者Cys时,不能用DMSO溶解,因为DMSO有氧化性,这很可能会导致肽链中含有的S被氧化;

(4)

专肽专柱:我们在开发Amyloid系列产品的过程中,发现用DMOS溶解的产品纯化后使用的纯化柱基本就不能用于其他产品的纯化,为了保证Amyloid产品的稳定,我们对于Amyloid等类似产品都配用了专门的纯化柱。


      在不影响您实验需求的情况下,也可以针对肽链的物理性质,化学性质和分子结构,对多肽进行修饰改变,增加其溶解性,以下是我们的建议:

(1)

修饰肽链中C端和N端:对于酸性肽,我们推荐C端乙酰化修饰;对于碱性肽,我们推荐N端氨基化修饰;

(2)

修改肽链中的氨基酸序列:某些序列存在大量的连续的疏水性氨基酸,例如W, F, V,I, L, M, Y ,这些疏水氨基酸在序列中大量或者连续重复出现时,整条肽链通常是难溶的,为了增强肽的极性和亲水性,我们建议客户在不影响实验结果的基础上,延长序列,或者通过减少疏水性氨基酸的个数来增加溶解性。

(3)

替换序列中疏水性氨基酸的残基:在不影响实验结果的基础上,用可溶性的氨基酸替代序列中的疏水性氨基酸可以达到增加溶解度的效果。我们通常用Gly, Ala来替换疏水性氨基酸,一般都会取得比较好的溶解效果,这也是一种保守但有效的增强多肽溶解度的方法。

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